Shrneme závěry studie na zvířatech, kterou společnost Pfizer předložila japonským zdravotnickým úřadům v roce 2020 a která se týkala distribuce a eliminace modelové vakcíny mRNA. Ukazujeme, že tato studie jasně předvídala vážná rizika srážení krve a další nežádoucí účinky. Neschopnost sledovat a hodnotit tato rizika v následných klinických studiích a hrubě nedbalý proces přezkoumání ve spojení s povolením pro nouzové použití předvídatelně vyústily v bezprecedentní zdravotní katastrofu.
1. Úvod a pozadí
Jako u každého léku je klíčovým faktorem toxicity vakcín proti COVID mRNA to, kde přesně v těle skončí a jak dlouho tam zůstanou. Takové otázky, které jsou předmětem farmakokinetiky, jsou obvykle důkladně prozkoumány a během vývoje léčiva. Počáteční studie farmakokinetiky a také toxicity jsou prováděny na zvířatech. Pokud je výsledek příznivý, budou podobné experimenty prováděny na malém počtu lidských dobrovolníků. Teprve poté, co budou úspěšně dokončeny takové předběžné studie, budou schváleny řádné klinické studie, které poté určí, zda má daný lék nebo vakcína požadovanou klinickou účinnost.
Vzhledem k oficiálně schválenému spěchu a systematické hrubé nedbalosti při vývoji a schvalování vakcín proti COVID-19 jsou naše znalosti o jejich farmakokinetice povrchní. Jediná poněkud podrobná studie na zvířatech, která se dostala na veřejnost, se týká vakcíny Pfizer [1, 2]. Tyto údaje byly zveřejněny poté, co je společnost Pfizer podala u zdravotnických úřadů v Japonsku, když žádaly o povolení nouzového použití své vakcíny v dané zemi.1 Tyto údaje se týkaly zejména distribuce vakcíny v těle po injekci a její eliminace z tělo. Přestože tento dokument není ani zdaleka úplný ani adekvátní, má poměrně dalekosáhlé důsledky: ukazuje, že společnost Pfizer – stejně jako úřady, které byly seznámeny s těmito údaji – musely rozpoznat vážná rizika nežádoucích účinků po očkování ještě před zahájením klinických studií. Nicméně vlastní klinické studie společnosti Pfizer nesledovaly žádná z klinických rizik, která byla z těchto údajů jasně patrná, a regulační orgány nedokázaly prosadit řádné standardy dohledu. Toto dvojí selhání způsobilo nejtěžší újmu veřejnosti.
Než tuto studii a její důsledky podrobně probereme, krátce si zopakujeme, jak vakcína Pfizer mRNA funguje. Tato vysvětlení platí také pro vakcínu mRNA Moderna, zatímco vakcíny AstraZeneca a Johnson & Johnson se v některých aspektech liší.
1.1 Jak vakcíny mRNA COVID fungují
Vakcíny mRNA Pfizer a Moderna se skládají ze syntetické messengerové RNA (mRNA), která kóduje „špičatý protein“ SARS-CoV-2, který se normálně nachází na povrchu částic koronaviru. Tato mRNA je potažena směsí syntetických lipidů (tukových molekul), které ji chrání během transportu v těle a které také usnadňují její příjem do cílových buněk endocytózou.
Jakmile vakcína vstoupila do buňky, zpočátku se ocitla uzavřena v membránovém váčku – malé bublině, která byla odtržena od buněčné membrány. Následná akumulace kyseliny uvnitř této bubliny způsobí odstranění lipidů a uvolnění mRNA do cytosolu (intracelulární tekutiny); tento krok uvolňování je usnadněn kationtovým lipidem ALC-0315 (viz dále). MRNA se poté váže na ribozomy – malé továrny na bílkoviny v buňce – a indukuje syntézu skutečných molekul špičkových proteinů. Většina molekul proteinových špiček bude poté transportována na povrch buňky.
Jakmile se tam objeví, bude rozpoznán B-lymfocyty (B-buňkami), které proti němu začnou vytvářet protilátky. z cely. Pokud k tomu dojde v oběhu, uvolněný fragment – označovaný jako S1 – se může vázat na krevní destičky (trombocyty) a aktivovat je. Tímto způsobem spike protein přímo podporuje srážení krve.
Jako u každého proteinu, který je syntetizován v buňce, malý počet molekul projde fragmentací a fragmenty budou prezentovány na povrchu buňky ve spojení se specifickými (HLA-) nosnými proteiny. Účelem tohoto mechanismu je imunitní dohled – jakmile se objeví fragmenty nějakého proteinu, který imunitní systém nerozpozná jako „já“, bude proti tomuto proteinu a proti buňkám, které jej produkují, zahájena imunitní odpověď. Tato reakce je zprostředkována cytotoxickými T-lymfocyty (CTL, T-killer buňky).
Při zvyšování své cytotoxické odpovědi imunitní systém nerozlišuje mezi skutečnou virovou infekcí a expresí vakcíny mRNA – dokud se na buňce objeví fragmenty špičkového proteinu, zabijácké buňky budou na pochodu. Pokud je vakcína exprimována v buňkách lemujících cévy – endoteliálních buňkách – vaskulární léze způsobená imunitním útokem opět spustí srážení krve. Po očkování tedy máme alespoň dvě odlišné cesty k srážení krve.
1.2 Vakcíny mRNA potažené lipidy získávají apolipoproteinovou „coronu“
Lipoproteinové částice se přirozeně vyskytují v krevním oběhu a v tkáních našeho těla. Skládají se z jádra lipidů, které je obklopeno skořápkou proteinů nazývaných apolipoproteiny. Jejich účelem je transport lipidů, jako je cholesterol a triacylglycerol (běžný tuk) mezi orgány. Například specifický typ lipoproteinu nazývaný chylomikrony transportuje dietní tuky poté, co byly absorbovány v tenkém střevě. Jiné lipoproteiny zvané VLDL a LDL distribuují tuky, které byly syntetizovány v játrech, do jiných orgánů a tkání.
Různé apolipoproteiny, které obalují lipoproteiny, stabilizují částice a slouží také jako „adresní značky“, které se vážou na molekuly receptoru na povrchu buněk. Tato interakce spustí příjem lipoproteinů do těchto buněk. Umělé lipidové nanočástice (LNP), jako jsou ty, které se používají ve vakcínách COVID mRNA, mohou získat skořápku – „korónu“ – tělních vlastních apolipoproteinových molekul [3]. To umožňuje, aby se tyto vakcíny dostaly také do buněk našeho těla.
Játra mají ústřední místo v metabolickém obratu lipidů a lipoproteinů. V souladu s tím jsou jaterní buňky bohaté na specifické povrchové molekuly receptorů, které zprostředkovávají příjem lipoproteinů, což naznačuje, že budou účinně přijímat LNP zdobené také apolipoproteiny. Je tomu skutečně tak. Avšak i jiné orgány mají vysokou míru vychytávání lipoproteinů, a proto je třeba očekávat, že budou akumulovat také LNP vakcinované apolipoproteiny.
1.3 Receptorem zprostředkovaná buněčná absorpce lipoproteinů a vakcín
Tento snímek ilustruje úlohu buněčných receptorů a apolipoproteinů při usnadňování příjmu vakcín do buněk pomocí endocytózy. Váží se na stejné buněčné receptory jako běžné lipoproteinové částice a následně se přijímají stejným způsobem. Následující události – uvolnění mRNA a syntéza proteinů – již byly diskutovány výše.
1.4 Transcytóza lipoproteinů z krevního oběhu do tkání
Veškerá výměna substrátu mezi tkáněmi a krevním oběhem probíhá v kapilárách. V těchto nejjemnějších cévách je krev oddělena od extracelulární matrix tkání pouze jednou buněčnou vrstvou- jmenovitě endoteliálními buňkami. Kapilární stěna umožňuje volný průchod pouze malým molekulám, jako je například krevní cukr (glukóza) nebo aminokyseliny. Lipoproteiny, které jsou mnohem větší, musí být transportovány přes kapilární stěnu transcytózou. V tomto dvoustupňovém procesu následuje endocytóza na jedné straně buňky exocytóza, tj. Uvolnění částic, ke kterému dochází na druhé straně.
Zatímco tento obrázek ukazuje transcytózu z krevního oběhu do tkáně, proces ve skutečnosti funguje v obou směrech. Tímto způsobem mohou buňky v tkáních využívat cholesterol přenášený cirkulujícím LDL, ale mohou také vracet přebytečný cholesterol krevním řečištěm do jater prostřednictvím jiných lipoproteinů (HDL).
Transcytóza se bude vztahovat také na LNP očkované vakcínou „koróny“ a umožní jim dosáhnout tkání v různých orgánech. Reverzní transcytóza vakcíny může přispět k jejímu příjmu ze svalové tkáně do oběhu po injekci
